Existem muitos fragmentos celulares após lise mecânica da suspensão celular.Como remover esses fragmentos?Vamos dar uma olhada nas várias abordagens:

1. Use o método de diluição.Quando as células são diluídas, elas também podem proliferar, tornar-se-ão cada vez mais numerosas e os restos celulares diminuirão correspondentemente.
2. Também existe assentamento natural.As células assentam mais rapidamente do que a maioria dos fragmentos: : Mova a suspensão de células para otubo de centrífuga, e quando a maioria das células afunda, a solução superior pode ser sugada e depois adicionada à solução de cultura para suspender as células.Este método pode ser usado repetidamente, enquanto cada vez você pode observar se ele atende aos seus requisitos sob o microscópio.
3. Centrífuga de baixa velocidadepode remover detritos, geralmente 700g, 5 minutos
4. Ao centrifugar, desde que o número de células seja suficiente, reduza o tempo de centrifugação, como 5min, 1000rpm, em vez de 3min, 1000rpm, e remova o sobrenadante, pois geralmente há necrose e detritos no sobrenadante!Esta operação só precisa ser realizada uma vez durante o processo de lavagem antes da incubação!

Embora existam muitas maneiras de remover detritos celulares, você descobrirá que a centrifugação é um dos métodos mais eficientes！

E como os tecidos e células vegetais possuem paredes celulares compostas por celulose, hemicelulose e pectina, geralmente é necessário moer areia de quartzo ou pó de vidro com solução de extração apropriada ou tratar com celulase para atingir o objetivo.A fragmentação das células bacterianas é mais difícil, porque todo o esqueleto da parede celular bacteriana é na verdade uma ligação covalente de macromoléculas císticas de peptidoglicano, muito resistentes.Os métodos comuns de quebrar as paredes celulares bacterianas incluem esmagamento ultrassônico, moagem com areia, extrusão de alta pressão ou tratamento com lisozima.Após a ruptura do tecido e das células, o tampão apropriado é selecionado para extrair a proteína desejada.Materiais insolúveis, como fragmentos celulares, são removidos porcentrífugaou filtração.

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