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Pontos-chave da cepa líquida da cultura do shaker celular

A cepa líquida é uma cepa cultivada com meio de cultura líquido.Tem as vantagens de um ciclo de produção de cepa curto, idade bacteriana consistente, inoculação conveniente, adequada para produção em fábrica e assim por diante.Foi bem recebido pela maioria dos produtores.Agitador de células (https://www.luoron.com/plastic-erlenmeyer-flask-with-vent-cap-2-product/) é um tipo de material consumível necessário na cultura de cepas líquidas.Os seguintes pontos precisam ser prestados atenção na cultura:

1.Preparação do meio de cultura de acordo com a fórmula de vários componentes, no recipiente, dissolver com água, dividido em garrafas triangulares, geralmente 250 ~ 300mL garrafa de agitação celular 50mL de meio de cultura,Frasco triangular de 500mL  (https://www.luoron.com/plastic-erlenmeyer-flask-with-vent-cap-2-product/)100mL de meio de cultura, tampão de algodão, embrulhado em jornal;Também pode ser feito de 8 camadas de gaze 8cm×8cm para vedação de rolha de garrafa, externamente com vedação de papel pardo.
2. O método de esterilização em autoclave é geralmente adotado para esterilização, que requer 121°C e 30min.Retire e deixe esfriar a cerca de 30 ℃.Coloque-o na sala estéril ou na caixa de inoculação para uso.
3. De acordo com os requisitos de operação asséptica, cada garrafa pode ser conectada com uma tensão inclinada de 2 ~ 3cm2, e cada tensão inclinada pode ser conectada com 4 ~ 5 garrafas.É melhor trazer algum meio com as cepas adicionadas, para que possam flutuar na superfície do meio.Após a inoculação, cobrir a boca do frasco com a gaze originalmente tapada e amarrar firmemente com barbante.
4. O frasco de cepa inoculado pode ser colocado em um leito agitador para cultura ou pode ser colocado em uma temperatura constante de 24 ~ 26 ℃ por 48h e, em seguida, a cultura oscilada pode ser realizada após o micélio aerogênico ser estendido para o meio de cultura .A frequência de oscilação do agitador alternativo é de 80 ~ 120 r/min, e a do agitador rotativo é de 150 ~ 220 r/min.3 ~ 4d podem ser cultivados no shaker.No final da cultura, devido às diferentes cepas, o meio de cultura apresentava cores diferentes, como cogumelo ostra, o meio de cultura do cogumelo enoki era amarelo claro;Cogumelo, meio de cultura ericius erinaceus era marrom avermelhado e fragrância de cogumelo;O meio de cultura do fungo é marrom, espesso e doce.O meio de cultura pode ser usado para produção ou expansão adicional da cultura somente quando o peso seco do micélio atingir 10g/L e o diâmetro dos pellets de micélio for de 1 ~ 2mm.
 
pl15. Produção de cepa líquida secundária produção de meio de cultura de cepa líquida secundária do mesmo nível de cepa líquida, o recipiente de cultura deve ser maior, a capacidade não é superior a 3500mL.Após esterilização e resfriamento, as cepas líquidas primárias fermentadas foram inseridas emAgitador de células 5L(https://www.luoron.com/3l5l-high-efficiency-erlenmeyer-flask-product/)numa proporção de 5%-10% e cultivada num agitador a uma velocidade lenta.Após certo tempo de cultura oscilante, podem ser obtidas cepas líquidas com distribuição uniforme de microesferas e líquido de fermentação límpido.
Em resumo, ao usar o agitador de células para cultivar cepas líquidas, opere de acordo com os métodos acima e preste atenção ao controle da temperatura, frequência de agitação e outros fatores no processo para garantir o efeito da cultura.
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Horário da postagem: 21 de março de 2023